مهار بیان ژن gfp به وسیله تداخل rna (rnai) در دودمان سلولی کارسینومای جنینی p۱۹

Authors

دکتر فریبا اسماعیلی

fariba esmaeili

abstract

مقدمه: تداخل ( rnai) rna نوعی پدیده خاموشی ژن است که در آن rna دو رشته ای ( dsrna ) با تخریب مؤثر mrna به طور اختصاصی، از بیان ژن جلوگیری می کند. واسطه این تخریب، rna های تداخل گر کوچک ( sirna) 21-23 نوکلئوتیدی هستند. نشان داده شده است که استفاده از sirna به عنوان ممانعت کننده بیان ژن، روشی مؤثر برای مطالعه عملکرد ژن در سلول های پستانداران است.   هدف: بررسی قابلیت sirna برای خاموشی ژن egfp در سلول بنیادی کارسینومای جنینی ( ec) ، p19 .   مواد و روش ها: در این مطالعه از نوعی سیستم بیان کننده sirna بر اساس وکتوری به نام psuper استفاده شد که قادر به القای rnai در سلول پستاندار (دودمان p19 ، سلول بنیادی کارسینومای جنینی موش) است. این وکتور قادر به بیان rna سنجاق سر کوچکی ( shrna ) است که نوعی ژن گزارشگر برون زاد به نام egfp را مورد هدف قرار می دهد. بیان egfp در سلول با استفاده از میکروسکوپ فلورسنت و فلوسایتومتری مورد ارزیابی قرار گرفت.   نتایج: با استفاده از پروتئین egfp به عنوان ژن گزارشگر، نشان داده شد که وکتور بیان کننده sirna می تواند به طور اختصاصی بیان ژن egfp را مهار کند. انتقال این پلاسمید به سلول های p19 به طور قابل توجهی تعداد سلول های بیان کننده egfp و خاصیت فلورسنتی آن ها را کاهش داد. اثر تداخل rna در هر دو نوع ترانسفکت سلولی موقت و پایدار به طور موفقیت آمیز مشاهده شد.   نتیجه گیری: نتایج نشان می دهد که استفاده از وکتور بیان کننده sirna سنجاق سری به منظور rnai روش امیدبخشی برای مهار بیان ژن در سلول های پستانداران است.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

مهار بیان ژن GFP به وسیله تداخل RNA (RNAi) در دودمان سلولی کارسینومای جنینی P19

 Introduction: RNA interference (RNAi) is a phenomenon of gene silencing that uses double-stranded RNA (dsRNA), specifically inhibits gene expression by degrading mRNA efficiently. The mediators of degradation are 21- to 23-nt small interfering RNAs (siRNA). The use of siRNAs as inhibitors of gene expression has been shown to be an effective way of studying gene function in mammalian cells.  Ai...

full text

بررسی مهار بیان ژن رپرسور گاماگلوبین با روش RNAi در رده سلولی اریتروئیدی 562 K با هدف ژن درمانی بتاتالاسمی

سابقه و هدف: بتاتالاسمی از بیماریهای ژنتیکی است که سبب کم‌خونی حاد در افراد مبتلا می‌شود. یکی از روشهای درمان بتاتالاسمی، القای ژن گاماگلوبین جنینی است. کمپلکس پروتئینی DRED از رپرسورهای گاماگلوبین است که از دو زیر واحد متصل شونده به DNA، به نام 2 TRو 4TR تشکیل شده است. یک روش جالب جهت افزایش بیان گاماگلوبین، مهار بیان 4TR توسط مولکول‌های siRNA می‌باشد. هدف از این تحقیق، راه‌اندازی سیستم RNAi ب...

full text

مهار بیان ژن نوکلئوستمین در رده سلولی سرطانی مثانه با واسطه استراتژی rnai

هدف: نوکلئوستمین جزء خانواده ای از پروتئین های هستکی است که به میزان زیادی در سلول های بنیادین جنینی، عصبی و مزانشیمی بیان می شود و در تنظیم خودبازسازی این سلول ها نقش دارد. بیش بیان این ژن در رده های سلولی سرطانی متعدد و نیز بافت های توموری چون تومورهای معده، کبد و پروستات نشان داده شده است. هدف از مطالعه حاضر، بررسی آثار سرکوب بیان این ژن در رده سلولی سرطانی مثانه با روش rnai است. مواد و روش ...

full text

بررسی مهار بیان ژن رپرسور گاماگلوبین با روش rnai در رده سلولی اریتروئیدی ۵۶۲ k با هدف ژن درمانی بتاتالاسمی

سابقه و هدف: بتاتالاسمی از بیماریهای ژنتیکی است که سبب کم خونی حاد در افراد مبتلا می شود. یکی از روشهای درمان بتاتالاسمی، القای ژن گاماگلوبین جنینی است. کمپلکس پروتئینی dred از رپرسورهای گاماگلوبین است که از دو زیر واحد متصل شونده به dna، به نام 2 trو 4tr تشکیل شده است. یک روش جالب جهت افزایش بیان گاماگلوبین، مهار بیان 4tr توسط مولکول های sirna می باشد. هدف از این تحقیق، راه اندازی سیستم rnai ب...

full text

تمایز عصبی سلول های کار سینومای جنینی p۱۹ بیان کننده ی ژن پروتئین فلوئورسانت سبز به وسیله داروی ضد پارکینسونی دپرنیل

زمینه و هدف: سلول های p19 دودمانی از سلول های کار سینومای جنینی چند استعدادی هستند که قادرند در محیط کشت حاوی سرم رشد نموده و برای تمایز به هر سه دودمان مزودرمی، آندودرمی و اکتودرمی القا شوند. با استفاده از روش های استاندارد ترانسفکشن می توان توالی dna خارجی را به این سلول ها وارد کرده و عملکرد و تمایز سلولی را بررسی کرد. این تحقیق با هدف القای فنوتیپ عصبی در سلول های p19 ترانسفکت شده با ژن پرو...

full text

“تولید انگل leishmania major تراریخته بیان کننده ژن green fluorescent protein (gfp)، به کمک ادغام ژن gfp به درون پروموتر rna ریبوزومی انگل“

تاکنون 6 گونه لیشمانیا شناخته شده است که باعث بیماری لیشمانیوز در انسان می شوند. از بین آن لیشمانیا اینفانتوم باعث بیماری کشنده کالا آزار و لیشمانیا ماژور باعث عوارض پوستی با ایجاد اسکار میشود. یکی از دلایل اهمیت کار روی لیشمانیا، شیوع بالای این بیماری است. در بررسی های تحقیقاتی که بر روی مدلهای حیوانی صورت گرفته است چندین روش استاندارد و در عین حال دشوار و وقتگیر (نظیر مشاهده فرم آماستیگوت انگ...

15 صفحه اول

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
دانشور پزشکی

جلد ۱۶، شماره ۷۸، صفحات ۵-۱۰

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023